準備室
準備室用于(yu)配(pei)制培(pei)養基和樣品處理等(deng)。室內設(she)有試劑柜、存放器(qi)具或材料的(de)專柜、實驗臺(tai)、電爐、冰箱(xiang)和上(shang)下水道(dao)、電源(yuan)等(deng)。洗滌室(shi)
洗滌(di)室
洗滌室用(yong)于洗刷器皿等。由于使用(yong)過的(de)(de)器皿已被微生物污染，有(you)時還(huan)會存在(zai)病原微生物。因此，在(zai)條件允許的(de)(de)情況下(xia)，應該設(she)置(zhi)洗滌(di)室(shi)。室(shi)內應備(bei)有(you)加(jia)熱器、蒸鍋(guo)，洗刷(shua)器皿用的盆、桶等(deng)，還應有(you)各種瓶刷(shua)、去污粉、肥皂、洗衣粉等(deng)。
滅菌室
滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)室(shi)主要(yao)用于培養基的滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)和各種(zhong)器具的滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)，室(shi)內應(ying)備有高(gao)壓(ya)蒸汽滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)器、烘箱(xiang)等滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)設(she)備及(ji)設(she)施(shi)。
無菌室
無菌(jun)室(shi)也(ye)稱(cheng)接種(zhong)室(shi)，是系(xi)統接種(zhong)、純(chun)化菌(jun)種(zhong)等無菌(jun)操(cao)作(zuo)的(de)專(zhuan)用實(shi)驗(yan)室(shi)。在(zai)微生物中，菌(jun)種(zhong)的(de)接種(zhong)移(yi)植是一項主(zhu)要(yao)操(cao)作(zuo)，這項操(cao)作(zuo)的(de)優點就是要(yao)保(bao)證菌(jun)種(zhong)純(chun)種(zhong)，防(fang)止雜(za)菌(jun)的(de)污染(ran)。在(zai)一般環境的(de)空氣中，由于存在(zai)許(xu)多(duo)塵埃(ai)和(he)雜(za)菌(jun)，很易(yi)造成污染(ran)，對接種(zhong)工作(zuo)干擾很大。
1.無菌室的設置
無菌室應根據既經濟又(you)科(ke)學的原則來(lai)設置。其基本要(yao)求有以下幾點：
①無(wu)菌(jun)室應有(you)內、外兩(liang)間，內間是(shi)無(wu)菌(jun)室，外間是(shi)緩(huan)沖室。房間容積(ji)不宜過大，以(yi)便于空氣(qi)滅菌(jun)。最(zui)小內間面(mian)積(ji)2×2.5＝5m2，外間面(mian)積(ji)1×2＝2m2，高以(yi)2.5m以(yi)下(xia)為宜，都應有(you)天花板。
②內間(jian)應(ying)當設拉門(men)，以減少空(kong)氣的(de)波(bo)動，門(men)應(ying)設在(zai)離工作臺最遠的(de)位置(zhi)(zhi)上；外間(jian)的(de)門(men)也用拉門(men)，要設在(zai)距內間(jian)最遠的(de)位置(zhi)(zhi)上。
③在分隔(ge)內(nei)間(jian)與外間(jian)的(de)(de)墻(qiang)壁或“隔(ge)扇”上，應開一(yi)個小窗(chuang)(chuang)(chuang)，作接(jie)種(zhong)過程中必要的(de)(de)內(nei)外傳遞物品(pin)的(de)(de)通道，以減少人員進(jin)出(chu)內(nei)間(jian)的(de)(de)次(ci)數，降低污染程度。小窗(chuang)(chuang)(chuang)寬60cm、高40cm、厚(hou)30cm，內(nei)外都掛(gua)對拉的(de)(de)窗(chuang)(chuang)(chuang)扇。
④無菌室容積(ji)小而嚴密，使用(yong)一(yi)段時間后，室內(nei)(nei)溫度很高，故應(ying)設置通(tong)氣(qi)窗。通(tong)氣(qi)窗應(ying)設在內(nei)(nei)室進門處的頂棚上(shang)（即(ji)離(li)工作臺最遠的位(wei)置），為(wei)雙層(ceng)結構，外層(ceng)為(wei)百葉窗，內(nei)(nei)層(ceng)可用(yong)抽板式窗扇。通(tong)氣(qi)窗可在內(nei)(nei)室使用(yong)后、滅菌前開啟(qi)，以流通(tong)空氣(qi)。有條件(jian)可安(an)裝恒溫恒濕機。
2.無菌室內設備和用具
①無菌(jun)室(shi)內的(de)工(gong)作(zuo)臺，不(bu)論是(shi)什么材質、用(yong)途的(de)，都要求表面(mian)光(guang)滑和臺面(mian)水平。
②在(zai)內室(shi)和外(wai)(wai)(wai)室(shi)各安裝(zhuang)一個紫(zi)(zi)外(wai)(wai)(wai)燈（多(duo)為30W）。內室(shi)的紫(zi)(zi)外(wai)(wai)(wai)線(xian)燈應安裝(zhuang)在(zai)經常工作的座位正上方(fang)，離地面2m，外(wai)(wai)(wai)室(shi)的紫(zi)(zi)外(wai)(wai)(wai)線(xian)燈可安裝(zhuang)在(zai)外(wai)(wai)(wai)室(shi)中央。 ③外(wai)(wai)(wai)室(shi)應有專(zhuan)用的工作服、鞋(xie)、帽、口(kou)罩、盛(sheng)有來蘇兒水(shui)的瓷盆(pen)和毛(mao)巾、手持噴(pen)霧器(qi)和5%石(shi)炭(tan)酸(suan)溶(rong)液(ye)等。
④內室應有酒精(jing)燈(deng)、常用接種工(gong)(gong)具、不銹鋼(gang)制(zhi)的(de)刀、剪、鑷子、70%的(de)酒精(jing)棉(mian)球、工(gong)(gong)業酒精(jing)、載玻璃片、蠟筆、記(ji)錄本(ben)、鉛筆、標簽紙(zhi)、膠水、廢物筐等。
3.無(wu)菌室的滅菌消毒
①薰蒸：這是無菌(jun)室徹底滅菌(jun)的措施。無菌(jun)室使用了較長時(shi)間，污染比較嚴重時(shi)，應進行薰蒸滅菌(jun)。可用甲醛、乳(ru)酸(suan)或(huo)硫磺薰蒸。
②噴(pen)(pen)(pen)霧(wu)：在每次使用(yong)無菌室前(qian)進行。噴(pen)(pen)(pen)霧(wu)可促使空氣中微(wei)粒及微(wei)生物沉降，防止桌面、地面上的微(wei)塵飛場，并(bing)有(you)殺菌作用(yong)。可用(yong)5%石炭(tan)酸噴(pen)(pen)(pen)霧(wu)。
③紫外(wai)線(xian)照(zhao)(zhao)射(she)：在每次(ci)使用無菌室前進行。紫外(wai)線(xian)有(you)較好的殺菌效果(guo)。通(tong)常應開啟(qi)紫外(wai)線(xian)燈照(zhao)(zhao)射(she)30～60min。
4.無(wu)菌室(shi)工(gong)作規程
①無菌(jun)室滅菌(jun)。每次使用(yong)前開啟紫(zi)外(wai)線燈照射30min以上，或在使用(yong)前30min，對(dui)內(nei)外(wai)室用(yong)5%石炭酸(suan)噴霧。
②用肥皂洗(xi)手(shou)后，把所需(xu)器(qi)材搬入外室；在外室換上已(yi)滅菌的工(gong)作(zuo)服、工(gong)作(zuo)帽和工(gong)作(zuo)鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手(shou)浸洗(xi)2分(fen)鐘。
③將各種(zhong)需用物品搬進(jin)內(nei)室清點、就位，用5%石炭酸在工作臺面(mian)上(shang)方和操作員站位空間噴霧(wu)，返(fan)回(hui)外室，5～10min后(hou)再進(jin)內(nei)室工作。
④接種操(cao)作(zuo)前，用70%酒精棉(mian)球擦手(shou)；進行無菌操(cao)作(zuo)時，動(dong)作(zuo)要輕緩，盡量減少空氣波動(dong)和地(di)面揚塵。
⑤工作(zuo)(zuo)中(zhong)應注意安全。如(ru)遇(yu)棉(mian)塞著火，用(yong)手緊握(wo)或用(yong)濕布包裹(guo)熄滅，切勿(wu)用(yong)嘴吹，以免擴大燃燒；如(ru)遇(yu)有菌培養物灑落或打碎有菌容器時，浸潤5%石炭(tan)酸的(de)抹布包裹(guo)后，并(bing)用(yong)浸潤5%石炭(tan)酸的(de)抹布擦拭臺面(mian)或地面(mian)，用(yong)酒精棉(mian)球擦手后再繼續操作(zuo)(zuo)。
⑥工(gong)作結束(shu)，立(li)即將臺面收拾(shi)干(gan)凈(jing)，將不應在無(wu)菌室(shi)存放的(de)物品和(he)廢棄物全部拿出無(wu)菌室(shi)后，對無(wu)菌室(shi)用(yong)5%石炭酸噴霧，或開紫(zi)外線燈照(zhao)射(she)30min。
恒溫(wen)培養箱
1.培養室的設置
①培養室(shi)應有內(nei)、外(wai)兩間(jian)(jian)，內(nei)室(shi)是(shi)培養室(shi)，外(wai)室(shi)是(shi)緩沖室(shi)。房間(jian)(jian)容積不宜大，以(yi)利于空氣滅菌，內(nei)室(shi)面積在3.2×4.4＝14m2左(zuo)右，外(wai)室(shi)面積在3.2×1.8＝6m2左(zuo)右，高(gao)以(yi)2.5m左(zuo)右為(wei)宜，都(dou)應有天(tian)花板。
②分隔內室(shi)與外室(shi)的(de)墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的(de)通風口。
③為滿(man)足(zu)微生物對溫(wen)度的需要(yao)，需安裝恒溫(wen)恒濕機。
④內外(wai)室都應在室中央安裝紫外(wai)線燈，以(yi)供滅菌用。
2. 培(pei)養(yang)室內設備及用具
①內(nei)室通常(chang)配備培(pei)養架(jia)和搖(yao)瓶機（搖(yao)床）。常(chang)用的搖(yao)瓶機有旋轉式(shi)、往復式(shi)兩種。
②外室應(ying)有(you)專用的(de)工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧(wu)器和5%石(shi)炭(tan)酸溶液、70%酒精棉球等。
3.培養室(shi)的滅菌消(xiao)毒
①同無菌室的滅菌、消(xiao)毒(du)措(cuo)施。
②小規(gui)模(mo)的培(pei)養可不啟用恒溫培(pei)養室，而在恒溫培(pei)養箱中進(jin)行。
普通(tong)實(shi)普通實驗室室
進行微生物的(de)(de)觀察、計數和生理(li)生化測定工作的(de)(de)場所。室內的(de)(de)陳設因工作側重點不同而有很大的(de)(de)差(cha)異。一般均配備(bei)實驗臺(tai)、顯微鏡、柜(ju)子及(ji)凳子。實驗臺(tai)要求平整、光滑(hua)，實驗柜(ju)要足以容納日常(chang)使用的(de)(de)用具及(ji)藥品等。
清潔區
包括辦(ban)公室(shi)、休息室(shi)、培養基配制室(shi)與試劑儲藏室(shi)。此區域禁止帶入細菌(jun)檢驗標本(ben)。
操作區
1.整潔：
微生(sheng)物操(cao)作區是(shi)各種病原菌(jun)相對集中的(de)地方(fang)，為了(le)減少(shao)粉塵流動，防(fang)止交(jiao)叉污染(ran)，操(cao)作區應與外(wai)界分開。實驗室(shi)工作人員(yuan)進(jin)(jin)入操(cao)作區應換鞋，送標本人員(yuan)不進(jin)(jin)入操(cao)作區，操(cao)作區地面(mian)用(yong)專用(yong)拖(tuo)把每天(tian)拖(tuo)1次，每(mei)周用(yong)消毒(du)劑(ji)擦洗1次。每(mei)天(tian)(tian)早上(shang)工作前，用(yong)紫外線(xian)照(zhao)射(she)30min，或每(mei)天(tian)(tian)工作后，用(yong)紫外線(xian)照(zhao)射(she)60min，對整個操作區進行(xing)消毒(du)；下午工作結束后用(yong)消毒(du)液(ye)消毒(du)工作臺面，以保證工作環境的安全清潔。
2.光線(xian)：
細(xi)菌培(pei)養的細(xi)小菌落及血清試驗凝集顆粒的觀察，都需(xu)要(yao)有(you)充足的光線。操(cao)(cao)作區除設置常規照明燈外，還必須安裝操(cao)(cao)作臺燈，以保證實驗結果的正確(que)判斷。
3.通風：
由于(yu)各種(zhong)病原(yuan)菌(jun)集中，空氣污(wu)濁(zhuo)，實驗室要(yao)求保持良好的通風。
4.溫度(du)和濕度(du)：
由于無菌操作的(de)(de)要求(qiu)，實(shi)驗(yan)過程中經常(chang)使用酒精燈(deng)，因此(ci)，微生物學實(shi)驗(yan)室不(bu)能安裝(zhuang)吊扇。為了達到實(shi)驗(yan)所需的(de)(de)適宜(yi)溫(wen)度，尤其是(shi)滿(man)足某些儀器對溫(wen)度濕度的(de)(de)要求(qiu)，實(shi)驗(yan)室應安裝(zhuang)空(kong)調(diao)。
5.電源：
要求提供穩(wen)壓(ya)、恒頻的(de)電源；根據儀器設備要求，必要時配備不(bu)間(jian)斷電源。
6.水源：
操作(zuo)區內(nei)須(xu)設置水源。用于標本(ben)處(chu)理（如細(xi)菌染色(se)）的水槽(cao)(cao)與工作(zuo)人(ren)員(yuan)洗手用的水槽(cao)(cao)不能(neng)混用。
7.污染物處理(li)：
操(cao)作區須(xu)備有(you)(you)消毒缸，以處(chu)理沾有(you)(you)活菌(jun)的玻片等(deng)污染物品。檢(jian)驗剩余的標本及使用(yong)過的帶菌(jun)平板、試管均須(xu)集中地(di)點安全(quan)放置，經(jing)消毒滅菌(jun)處(chu)理后(hou)再洗滌或丟棄。
無菌區
1.無(wu)菌室(shi)應完(wan)全(quan)封閉，進出(chu)無(wu)菌室(shi)至(zhi)少要(yao)經兩道門，中(zhong)間(jian)隔有緩沖間(jian)，無(wu)菌室(shi)與外間(jian)設置一個可開閉的窗口，用于傳遞器具。
2.無菌室必須保持(chi)整潔。工(gong)作(zuo)人(ren)員進入無菌室應換(huan)專(zhuan)(zhuan)用鞋、專(zhuan)(zhuan)用衣。無菌室使用前須用紫外(wai)線(xian)消(xiao)(xiao)毒30min，操作(zuo)結束后清潔臺面，再用紫外(wai)線(xian)消(xiao)(xiao)毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸，徹底消(xiao)(xiao)毒。
3.無(wu)菌(jun)室僅用于(yu)培養基分裝等(deng)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)，不能進行有菌(jun)標本的操(cao)作(zuo)。操(cao)作(zuo)人員操(cao)作(zuo)時應(ying)嚴格(ge)關門，并戴好專用的口罩、帽子。
4.無菌室內應有空(kong)氣過(guo)濾裝置，并安(an)裝空(kong)調。
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